病毒可以借助幾種顯微鏡技術(shù)進(jìn)行研究。根據(jù)顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率，可以在組織水平、細(xì)胞水平或病毒粒子水平進(jìn)行觀察（圖1）。通常，病毒粒子本身只能通過(guò)電子顯微鏡或超分辨顯微鏡來(lái)分辨。在細(xì)胞水平上，病毒大多借助先進(jìn)的寬場(chǎng)熒光或共焦顯微鏡進(jìn)行觀察。在組織中，明場(chǎng)顯微鏡或基本的寬場(chǎng)熒光顯微鏡足以用于病毒研究。但是顯微技術(shù)的鑒別并不是嚴(yán)格的。

徠卡的THUNDER實(shí)時(shí)成像（WO2019 /185174 A1）可以幫助提高背景信噪比，減少離焦模糊。相關(guān)的對(duì)比度增強(qiáng)可以揭示顯微圖像中的附加信息。

在測(cè)序技術(shù)、生物信息學(xué)和電子顯微鏡中，Ogando等人通過(guò)熒光顯微鏡分析了感染細(xì)胞：VeroE6細(xì)胞生長(zhǎng)在玻璃蓋玻片上，感染SARS-CoV-2，并用多聚甲醛固定。然后，用事先暴露于SARS-CoV的兔子或小鼠的抗血清孵育細(xì)胞（圖2）。用熒光標(biāo)示的二級(jí)抗體檢測(cè)與VeroE6細(xì)胞SARS-CoV-2結(jié)構(gòu)結(jié)合的SARS-CoV源性抗體。此外，細(xì)胞核用Hoechst染色。用DM6 B正置熒光顯微鏡進(jìn)行熒光成像。 

免疫熒光顯微鏡顯示，許多SARS-CoV抗血清在SARS-CoV-2感染細(xì)胞（病毒蛋白nsp3、nsp4、nsp5、nsp8、nsp9、nsp13、nsp15、N、M）中具有交叉反應(yīng)性。這一事實(shí)意味著，針對(duì)SARS-CoV產(chǎn)生的抗血清也導(dǎo)致SARS-CoV-2感染細(xì)胞的特征性熒光染色（圖3）。nsps出現(xiàn)在感染細(xì)胞的核周區(qū)，而N蛋白則分布在胞漿中。在高爾基體中檢測(cè)到M蛋白。

Ogando等人的研究中描述的交叉反應(yīng)抗血清將是特征性SARS-CoV-2復(fù)制周期的實(shí)用工具。這個(gè)工具反過(guò)來(lái)能使研究人員能夠確定復(fù)制抑制劑的潛在目標(biāo)。

一個(gè)相對(duì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)裝置-免疫熒光顯微鏡-足以得出病毒復(fù)制周期的結(jié)論。因?yàn)樵谶@種方法中細(xì)胞生長(zhǎng)在蓋玻片上，并安裝在玻片上，所以正置熒光顯微鏡是一種實(shí)用的解決方案。配備有電動(dòng)載物臺(tái)和采用寬視野（FOV）的自動(dòng)化掃片模塊幫助用戶快速獲取全玻片的圖像概覽。如果單視野快拍就能滿足需求，則機(jī)械式載物臺(tái)是更合理的選擇。

圖為THUNDER DM6B實(shí)時(shí)自動(dòng)掃描的小鼠視網(wǎng)膜組織。

（左側(cè)為普通DM6B的寬場(chǎng)熒光成像，右側(cè)為THUNDER DM6B的熒光成像）